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磷脂酶D（ Phospholipases D，PLD ）試劑盒說明書
分光光度法 50 管/48 樣
磷脂酶 D（EC3.1.4.4）即磷脂酰dan堿水解酶，是催化磷酸二酯鍵水解和堿基交換反應的一類酶的總稱，廣泛存在于高等動植物和細菌等多種生物體中，具有參與細胞脂質代謝、信號傳導、生物膜形成的抗逆境脅等生理功能。
磷脂酶D 催化水解磷脂酰dan堿末端的磷脂酰二酯鍵生成磷脂酸和dan堿，dan堿在dan堿氧化酶催化作用下生成甜菜堿和過氧化氫，過氧化氫在過氧化氫酶的作用下將 4-氨基安替bi林和重蒸酚氧化成粉紅色物質，在 500nm 處有特征吸收峰。
產品名稱 | BR6025-50T/48S | Storage |
提取液：液體 | 50ml | 4℃ |
試劑一：液體 | 55ml | 4℃避光 |
試劑二：液體 | 8ml | 4℃避光 |
試劑三：粉劑 | 1 瓶 | -20℃避光 |
試劑四：液體 | 35ml | 4℃避光 |
標準品：液體 | 1ml | 4℃避光 |
說明書 | 一份 | |
試劑三：粉劑×1 瓶，-20℃避光保存。臨用前加 3ml 無水乙醇充分溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。
具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準
天平、研缽、超速冷凍離心機、可見分光光度計、1 ml 玻璃比色皿、恒溫水浴鍋，無水乙醇。
1. 組織：按照質量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g，加入 1ml 提取液）加入提取液，冰浴勻漿后于 4℃，10000g 離心 5min，取全部上清于 4℃、100000g 離心 30min，棄上清，取沉淀溶于 1ml 試劑一。
2. 細胞：按照細胞數量（104 個）：提取液體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細胞加入 1ml提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時間 3min）；然后于 4℃，10000g離心 5min，取全部上清于 4℃、100000g 離心 30min，棄上清，取沉淀溶于 1ml 試劑一。
3. 血清：直接測定。
空白管 | 標準管 | 測定管 | |
試劑一（μl） | 100 | ||
試劑二（μl） | 150 | 150 | 150 |
標準品（μl） | 100 | ||
樣品（μl） | 100 | ||
試劑三（μl） | 50 | 50 | 50 |
充分混勻，30℃反應 30min，沸水浴 10min，打開蓋子，自然冷卻 5min。 | |||
試劑四（μl） | 700 | 700 | 700 |
30℃反應 30min，于 1ml 玻璃比色皿，空白管調零，測定 500nm 處吸光值，分別記為 A 標準管和A 測定管。 | |||
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