植物葉綠素(chlorophyll)含量試劑盒說明書
微量法 100T/96S
植物葉綠素廣泛存在于綠色植物組織中,其含量與光合作用、營養狀況密切相關,是反應植物生長狀況的重要指標。
葉綠素a 和葉綠素b 在 645nm 和 663nm 處有最大吸收,根據經驗公式可計算得葉綠素a 和葉綠素b以及總葉綠素含量。
產品名稱 | BU6008-100T/96S | Storage |
試劑一:粉劑 | 1 瓶 | 4℃ |
說明書 | 一份 |
自備儀器和用品:
天平、研缽、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、10mL 玻璃試管、錫箔紙、丙酮。
具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準
1. 稱取約新鮮植物葉片或其它綠色組織,去掉中脈,稱取約 0.1g,剪碎,用蒸餾水洗干凈。
2. 提取液的準備:取 240ml 蒸餾水和 960ml 丙酮,充分混勻待用。
3. 加入 1ml 蒸餾水,少量試劑一(約 50mg),在黑暗或弱光條件下充分研磨,轉入 10ml 玻璃試管。
4. 用提取液沖洗研缽,將所有沖洗液轉入玻璃試管,用提取液補充至 10ml,玻璃試管置于黑暗條件下或者包上錫箔紙浸提 3h,觀察試管底部組織殘渣wan全變白則提取wan全,若組織殘渣未wan全變白,繼續浸提至其wan全變白。
5. 取浸提液 200μL 于微量石英比色皿/96 孔板,提取液調零,測定 663nm 和 645nm 處吸光值,分別記為A663 和A645 。
葉綠素a 含量(mg/g 鮮重)=(12.7× A663 – 2.69 × A645)×V 提×D÷m÷1000
= 0.01×(12.7× A663 – 2.69 × A645)×D÷m
葉綠素b 含量(mg/g 鮮重)=(22.9× A645 – 4.68 × A663)×V 提×D÷m÷1000
= 0.01×(22.9× A645 – 4.68 × A663)×D÷m
葉綠素總含量(mg/g 鮮重)=(20.21× A645 +8.02 × A663)×V 提×D÷m÷1000
= 0.01×(20.21× A645 +8.02 × A663)×D÷m
V 提:提取液體積,10ml;D:稀釋倍數;m:樣本質量,g
1. 葉綠素對光敏感,研磨和提取等操作盡量避光或者在弱光下進行。
2. 一定要浸提至組織殘渣wan全變白,否則提取不充分。
3. 用提取液沖洗研缽一定要沖洗至所有的綠色物質被轉移至玻璃試管。
4. 測定時吸光值超過 1,可進行適當稀釋。
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