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分光光度法 50 管/24 樣
FDA 水解反應(yīng)能很好的反應(yīng)土壤中微生物活性和土壤質(zhì)量的變化以及生態(tài)系統(tǒng)中有機(jī)質(zhì)的轉(zhuǎn)化,是土壤質(zhì)量研究中的重要生物學(xué)指標(biāo)之一。
FDA 是一種無(wú)色化合物,在介質(zhì)中能被許多土壤酶所催化水解,并經(jīng)脫水反應(yīng),產(chǎn)生酶解終產(chǎn)物熒光素,穩(wěn)定不易被分解,并在 490nm 處有強(qiáng)吸收峰,通過(guò)檢測(cè) 490nm 處的吸光值變化可計(jì)算得 FDA 水解酶活性。
產(chǎn)品名稱 | BO6040-50T/24S | Storage |
標(biāo)準(zhǔn)液:液體 | 5ml | 4℃ |
試劑一:液體 | 50ml | 4℃ |
試劑二:粉劑 | 1 瓶 | -20℃避光 |
試劑三:液體 | 50ml | 4℃ |
說(shuō)明書(shū) | 一份 |
試劑二:粉劑 1 瓶,-20℃避光保存,臨用前加 5ml 試劑三溶解。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)
天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 ml 玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。
稱取風(fēng)干過(guò) 30-50 目篩土壤約 0.1g,備用。
空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 對(duì)照管 | 測(cè)定管 | |
樣本(g) | 0.1 | 0.1 | ||
標(biāo)準(zhǔn)液(μl) | 100 | |||
雙蒸水(μl) | 100 |
試劑一(μl) | 500 | 500 | 600 | 500 | ||
試劑二(μl) | 100 |
充分混勻,30℃,震蕩 1h
試劑三(μl) | 400 | 400 | 400 | 400 |
10000g,25℃,離心 5min,取上清測(cè)定 490nm 處吸光值 A,△A1=A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管,△A2=A 測(cè)定管-A 對(duì)照管
酶活性定義:每克土壤每天產(chǎn)生 1μmol 熒光素的量為一個(gè)酶活力單位。
FDA 活性(μmol/d/g 干重)=(△A2÷△A1×C 標(biāo)準(zhǔn)品)×V 反總÷W= 2.4×(△A2÷△A1)÷W C 標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品濃度 100μmol/L;V 反總:反應(yīng)總體積,1ml;W:樣本質(zhì)量,g
1、空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。
2、盡量采用新鮮土樣或者短期低溫保存樣品,否則很難準(zhǔn)確反映酶的活性。
3、測(cè)定之前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),若吸光值較高,請(qǐng)進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂屧贉y(cè)定,并在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
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