土壤纖維素酶（Solid-cellulase，S-CL）活性測定試劑盒說明書

微量法 100 管/48 樣

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：

S-CL 主要來源于土壤微生物，S-CL 催化農作物秸稈產生的葡萄糖是主要的碳源營養物質。

測定原理：

采用蒽酮比色法測定S-CL 催化纖維素降解產生的還原糖的含量。

土壤纖維素酶活性測定試劑盒   土壤系列

試劑的組成和配制：

試劑四：粉劑×1 瓶，4℃保存； 臨用前加入 5ml 蒸餾水和 45ml 濃硫酸充分溶解待用。

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準

自備儀器和用品：

酶標儀/可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、96 孔板/微量石英比色皿、甲苯、硫酸（不允許快遞）和蒸餾水。

樣品處理：

新鮮土樣自然風干或 37 度烘箱風干，過 30~50 目篩。

加樣表和測定步驟：

1、分光光度計預熱 30min 以上，調節波長至 570nm，蒸餾水調零。

2、加樣表(在 1.5ml 棕色EP 管中按下表依次加樣）：

37℃振蕩反應 3h 后，90℃水浴 15min（蓋緊，防止水分散失），冷卻后

8000g 25℃離心 10min，取上清，得糖化液

混勻， 90℃水浴 10min（蓋緊，防止水分散失），冷卻，取 200μl 至微量石英比色皿或 96 孔板中，測 620nm 下吸光值A，計算ΔA=A 測定管-A 對照管。每個測定管設一個對照管。

S-CL 活力計算：

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為y = 5.018x - 0.0462；x 為標準品濃度（mg/ml），y 為吸光值。單位的定義：每天每 g 土樣中產生 1mg 葡萄糖定義為一個酶活力單位。

S-CL 活力（mg/d/g）＝(ΔA+0.0462) ÷5.018×V 反總÷W÷T =19.1×(ΔA+0.0462)

T：反應時間，3h=1/8d； V 反總：反應體系總體積：0.6ml；W：樣本質量，0.05g。

b. 用 96 孔板測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為y = 2.5090x - 0.0462；x 為標準品濃度（mg/ml），y 為吸光值。單位的定義：每天每 g 土樣中產生 1mg 葡萄糖定義為一個酶活力單位。

S-CL 活力（mg/d/g）＝(ΔA+0.0462) ÷2.5090×V 反總÷W÷T =38.3×(ΔA+0.0462)

T：反應時間，3h=1/8d； V 反總：反應體系總體積：0.6ml；W：樣本質量，0.05g。

土壤纖維素酶活性測定試劑盒   土壤系列