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Tris-Tricine-SDS-PAGE凝膠制備試劑盒 凝膠
產品貨號:P9108
產品名稱:Tris-Tricine-SDS-PAGE 凝膠制備試劑盒
產品規格:25T / 50T/ 100T
產品簡介:
英文名稱:Tris-Tricine-SDS-PAGE
中文名稱:Tris-Tricine-SDS-PAGE 凝膠制備試劑盒
規格:25T ; 50T ; 100T
儲存條件:2-8℃,avoid light,1 year
具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準
產品簡介:
常規的Tris-SDS-PAGE電泳的只能分辨大分子蛋白,對于相對分子量小的,尤其是10 kD 以下的蛋白分辨率極低。而Tricine-SDS-PAGE可以很好的分離分子量在1-10 kD的蛋白及多肽,成為目前電泳法變性分離多肽的主要方法。本產品包括Tricine-SDS- PAGE 凝膠制備所需全套試劑,只需自備蒸餾水,即可制備高質量各種濃度的凝膠,方便、快捷,電泳后可直接用于考染、銀染、Western雜交等實驗。
Tris-Tricine-SDS-PAGE凝膠制備試劑盒 凝膠
注意事項:
1、10%APS配制后分裝-20 度保存。APS溶液不穩定,應盡量減少室溫存放時間,每次取用后立即放回冰箱,以防失效;若發現凝膠聚合時間延長,應考慮更換,使用-20 度保存的10%APS。
2、在凝膠配制過程中,尤其是液體混勻步驟,應盡量避免氣泡的產生。
3、在分離膠上層加蒸餾水時要小心操作,加水時速度不能太快。
4、丙烯酰胺具有神經毒性,操作時請穿著實驗服并佩戴一次性手套。
5、本產品僅用于科研,不能用于人體實驗或人體治療。
I 配制分離膠
1、將不同體積的雙蒸水、49.5%T 6%C 、凝膠緩沖液和甘油加入到離心管中混合。
2、加入 10% PAGE 膠凝固劑和 PAGE 膠促凝劑,立即渦旋混勻 5-10 秒,以使溶液充分混勻。
3、在凝膠模具中迅速灌入適量分離膠溶液(1 mm mini-gel,分離膠溶液加約 4 ml ),然后在分離膠溶液上輕輕 覆蓋一層 1-3 cm 的水層,使凝膠表面保持平整。
4、靜置,待分離膠和水層之間出現一個清晰的界面表示凝膠已聚合。
II 配制夾層膠
去除覆蓋在分離膠上的水層,用濾紙將殘留的水盡量吸去。
1、將不同體積的雙蒸水、49.5%T 3%C 和凝膠緩沖液加入到離心管中混合。
2、加入 10% PAGE 膠凝固劑和 PAGE 膠促凝劑,立即渦旋混勻 5-10 秒,以使溶液充分混勻。
3、將適量的夾層膠溶液迅速加至分離膠的上面(對于 1 mm 的 mini-gel,夾層膠溶液加約 1 ml ), 然后在夾層膠溶液上輕輕覆蓋一層水層,使凝膠表面保持平整。
4、靜置,待夾層膠和水層之間出現一個清晰的界面表示凝膠已聚合。
III 配制濃縮膠
去除覆蓋在夾層膠上的水層,用濾紙將殘留的水吸去。
1、將不同體積的雙蒸水、49.5%T 3%C 和凝膠緩沖液加入到離心管中混合。
2、加入 10% PAGE 膠凝固劑和 PAGE 膠促凝劑,立即渦旋混勻 5-10 秒,以使溶液充分混勻。
3、將梳子插入凝膠內,避免產生氣泡。
4、待凝膠聚合后,小心地拔出梳子,以免破壞加樣孔。
5、進行電泳操作。
IV 電泳
將電泳槽放入 4℃或冰水浴中,外槽加入陽極緩沖液,內槽加入陰極緩沖液,30V 預電泳 10min, 將樣品(已經過 Tricine 專用上樣緩沖液處理)加入點樣孔后 30V 電泳 1 小時,100V 電泳至溴酚藍到達膠底 部后停止電泳,進行后續的考馬斯亮藍染色或電轉。
產品訂購信息:
NobleRyder P9108 Tris-Tricine-SDS-PAGE 凝膠制備試劑盒 25T / 50T/ 100T
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